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抗乳鐵蛋白單克隆抗體的特異性是什么?

點擊次數:314  發布時間:2020-10-27
   抗體是一種由漿細胞(效應B細胞)分泌,被免疫系統用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質,僅被發現存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。
  乳鐵蛋白是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白,中性粒細胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。主要由乳腺上皮細胞表達和分泌。
  抗乳鐵蛋白單克隆抗體對由第1單克隆抗體和第二單克隆抗體組成,所述第1單克隆抗體由保藏的雜交瘤細胞株分泌得到,所述第二單克隆抗體由保藏的雜交瘤細胞株分泌得到。本發明還提供了如上所述的人乳鐵蛋白單克隆抗體對在制備檢測人乳鐵蛋白的試劑盒中的用途。通過上述技術方案,本發明能夠通過雙抗夾心免疫試紙檢測方法,對人乳鐵蛋白的檢測取得的靈敏度,對牛乳鐵蛋白和羊乳鐵蛋白不呈現交叉反應,并且對人溶菌酶轉基因牛、人α?乳清白蛋白轉基因牛不呈現交叉反應,具有較高的敏感度和特異性。
  抗乳鐵蛋白單克隆抗體的特異性:抗乳鐵蛋白單克隆抗體和人轉鐵蛋白沒有交叉反應,但是單克隆抗體和人轉鐵蛋白交叉反應微弱。
  單克隆抗體制備的基本過程如下:
  (1)用抗原免疫小鼠;
  (2)從抗原免疫過的小鼠獲取脾細胞;
  (3)應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合,得到雜交瘤細胞。這種細胞不僅能夠像B淋巴細胞一樣合成性質穩定的轉移性抗體,而且能夠像骨髓瘤細胞一樣無限復制,這樣就可以產生大量且性質專一的鼠源抗體;
  (4)對獲得的雜交瘤細胞進行篩選,選出能分泌高效價抗體的雜交瘤;
  (5)對已篩選出的單個細胞進行鑒定和克隆。
  雜交瘤產生的單克隆抗體在各個領域中應用越來越廣,有很大的優點和潛力。能夠根據需要進行研發生產,可建立穩定的細胞株持續供給應用,相比于抗血清能夠減少大量的動物和費用,而且純度高,均一性好,可作為一種標準試劑。
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