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四環素類ELISA檢測試劑盒

型 號四環素類

產品時間2019-01-24

所屬分類食品安全試劑盒

報價

產品描述:四環素類ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中四環素類的殘留量。
定量檢測組織、蜂蜜、牛奶樣本中四環素類殘留。

產品概述

一、原理

四環素類ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品四環素類殘留量。

二、適用范圍

定量檢測組織、蜂蜜、牛奶樣本中四環素類殘留。

三、四環素類ELISA檢測試劑盒特點及技術指標

* 檢 測 時 間 : 40min

  試劑盒靈敏度: 0.1ppb(µg/kg)

* 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值<1ppb;

* 樣品直接稀釋用于檢測,結果準確;

* 試劑盒提供近工作濃度標準品,使用更方便。

試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度:

樣本

檢測下限

回收率

蜂蜜

3ppb

70%-120%

組織

4ppb

70%-120%

牛奶

0.1ppb

70%-120%

試劑盒特異性

藥物名稱

交叉反應率(%)

四環素

100%

       土霉素

82%

金霉素

73%

、所需材料

儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm、均質器、振蕩器、離心機、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:去離子水

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

四環素酶標板

12×8孔

2

50×四環素標準品*5

5×0.5mL

3

四環素類酶標物

7 mL

4

四環素類抗體

7mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

四環素標品稀釋液

30mL

10

10×四環素樣品稀釋液

10mL

11

   10×四環素提取液

30mL

*注:A、B、C、D、E5個標準品濃度為:0 ppb, 5 ppb,15 ppb, 45ppb, 135ppb,稀釋50倍使用,現配現用,配后避光放置并于半小時內使用,具體見溶液配制。

六、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋,用于酶標板的洗滌,洗滌工作液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液2: 1×四環素樣品稀釋液

用去離子水將10×四環素樣品稀釋液按1: 9的體積比進行稀釋,用于樣本的稀釋,1×四環素稀釋液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。                                                         

配液3: 1×四環素提取液

  用去離子水將10×四環素提取液按1: 9的 體積比進行稀釋,用于樣本的提取,1×四環素提取液在室溫環境可保存一個月。

配液4:  四環素工作濃度標準品

   50×四環素

      

四環素標品稀

釋液

工作濃度標

準品

 0 ppb      10 µL

 +490 µL

0 ppb

 5 ppb      10 µL

 +490 µL

0.1 ppb

 15 ppb     10 µL

+490 µL

0.3 ppb

 45 ppb     10 µL

+490 µL

0.9 ppb

135 ppb    10 µL

+490 µL

2.7 ppb

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。② 樣本數目超過8個時推薦使用排槍加樣。

(一)蜂蜜 (原蜜、成品蜜,稀釋倍數:30)

① 稱取樣品1.0g ± 0.05g至7mL離心管中,加  入2mL 去離子水,震蕩使其溶解(若渾濁需離心);

② 取出50μL清亮液體,加到450μL 去離子水中,混勻,取50μL直接用于分析。

(二)豬肉、魚蝦、雞肉(稀釋倍數:40)

① 稱取樣品1.0g ± 0.05g至50mL離心管中,加  入3mL  1×四環素提取液,震蕩提取2-3min;

② 4000rpm離心5min;

③ 取50μL上清液加到450μL1×四環素樣品稀釋液,混勻,取50μL用于分析。

(三)生鮮奶(稀釋倍數:1)

  取新鮮無變質的生奶,取適量回溫后直接用于分析。

、 酶標免疫測定程序

  • 將所有所需試劑從冷藏環境中取出,待其完全回升至室溫后方可使用,根據體積大小不同取出回溫的時間從1小時~3小時。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標準品和樣品雙孔平行的數量使用微孔。
  •  加標準品/樣品、酶、抗體:加標準品/樣品50µL 到對應的微孔中,加入四環素類酶標物50µL /孔, 再加入四環素類抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環境中反應30min。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,

加入洗滌工作液250 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內液體,重復洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

  •  顯色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物    

液B液50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環境中反應10min。

  •  測定:加入終止液50µL/孔,用酶標儀立即  測定雙波長450/630nm吸光度值。

、 結果判定

以標準品百分吸光率為縱坐標,以四環素類標準品濃度(ppb)的半對數為橫坐標,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中四環素類實際濃度。(詳見試劑盒專業分析軟件,以便進行大量樣本的分析計算。)

、 注意事項

① 根據體積大小不同取出回溫的時間從1小時~2小時,體積15毫升以上的先從冷藏環境取出回溫。

② 50*四環素標品使用完畢后請及時放回冰箱避光保存。

反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。

⑤ 0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色    時間為15min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到20min,反之則減短反應時間。

⑦ 底物液B液長期使用變為淺藍色時,請放心使用,不影響檢測結果。

未提及樣本請致電本公司技術服務部。

十一、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質 期: 12個月

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