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替米考星ELISA檢測試劑盒

型 號替米考星

產品時間2019-01-24

所屬分類食品安全試劑盒

報價

產品描述:替米考星ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中替米考星的殘留量。定量檢測組織樣本中替米考星殘留。

產品概述

一、原理

替米考星ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品替米考星殘留量。

二、適用范圍

定量檢測組織樣本中替米考星殘留。

三、替米考星ELISA檢測試劑盒特點及技術指標

* 檢 測 時 間 : 30min

  試劑盒靈敏度: 0.1ppb(µg/kg)

* 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值<0.04ppb;

* 樣品處理方法簡潔,符合率大于95%;

試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度:

試劑盒交叉反應率:

藥物

交叉反應率%

替米考星

100

紅霉素

12

環丙沙星

1

、所需材料

儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm、均質器、振蕩器、離心機、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:去離子水、乙腈

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

替米考星酶標板

12×8孔

2

替米考星標準品*5

5×0.5mL

3

替米考星酶標物

7 mL

4

替米考星抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

9

2×替米考星樣品稀釋液

40mL

10

10×替米考星樣品提取液

40mL

11

20×洗滌液

40mL

樣本

檢測下限

回收率

組織

10ppb 

70%-120%

*注:5個標準品A、B、C、D、E濃度分別為:0 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb, 0.9 ppb, 2.7 ppb,A、B各1 mL,C、D、E各0.5 mL,直接使用。

 

六、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋,用于酶標板的洗滌,洗滌工作液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液2:  1 ×替米考星樣品稀釋液    

用去離子水將2×替米考星樣品稀釋液按1:1體積比進行稀釋。配好替米考星樣品稀釋液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液3:  1 ×替米考星樣品提取液    

用去離子水將10×替米考星樣品提取液9:1體積比進行稀釋。配好替米考星樣品提取液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。② 樣本數目超過8個時推薦使用排槍加樣。

組織(稀釋倍數:100)

  • 稱取糊狀樣品1.0g ± 0.05g至50mL離心管中,加入2mL 替米考星樣品提取液, 震蕩提取1min;
  • 再加入2 mL乙腈,震蕩提取1min;
  • 4000rpm離心5min.;
  • 小心取出上層溶液50μL至另一裝有950μL 替米考星樣品稀釋液的離心管中,震蕩混勻,取50μL用于分析。

、 酶標免疫測定程序

  • 將所有所需試劑從冷藏環境中取出,待其完全回升至室溫后方可使用,根據體積大小不同取出回溫的時間從1小時~2小時。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  •  按標準品和樣品雙孔平行的數量使用微孔。
  •  加標準品/樣品、酶、抗體:加標準品/樣品50µL到對應的微孔中,加入替米考星酶標物50µL/孔,加入替米考星抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環境中反應20min。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,

加入洗滌工作液300 µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內液體,重復洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

  •  顯色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物    

   液B液50 µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜             

     蓋板后置37℃避光環境中反應10min。

  • 測定:加入終止液50µL/孔,用酶標儀立即  測定450/630nm處的吸光度值。

、 結果判定

以標準品百分吸光率為縱坐標,以替米考星標準品濃度(ppb)的半對數為橫坐標,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中替米考星實際濃度。(詳見試劑盒專業分析軟件,以便進行大量樣本的分析計算。)

、 注意事項

① 根據體積大小不同取出回溫的時間從1 h~3 h,體積15 mL以上的先從冷藏環境取出回溫,

洗板拍干后應立即進行下一步操作。

反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。

⑤ 0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色    時間為15min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到20min,反之則減短反應時間。

⑦ 底物液B液長期使用變為淺藍色時,請放心使用,不影響檢測結果。

十一、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質 期: 12個月

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