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豬藍耳病毒抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書

型 號

產品時間2021-12-14

所屬分類動物疫病試劑盒

報價

產品描述:豬藍耳病毒抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行50倍稀釋(建議:4μl血清樣品加入196μl樣品稀釋液中),樣品加入包被板前要充分混勻,稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意:①制備血清用的血液樣本應無溶血現象發生;②不能稀釋陰性、陽性對照。

產品概述

豬藍耳病毒抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書

Service manual of ELISA Kit for PRRS Virus antibody

【產品簡介】豬藍耳?。?/span>PRRS)是一種高致病率、高死亡率的病毒病,給國內養豬業造成巨大的損失。在免疫預防工作中,接種了疫苗后,由于多種因素可能導致豬不產生或產生低水平藍耳病病毒抗體。

本試劑盒采用酶聯免疫吸附試驗檢測豬血清中PRRSV抗體,用于免疫疫苗后抗體動態水平監測,指導免疫預防工作,評估豬場藍耳病免疫狀況,也可用于藍耳病的流行病學調查。

豬藍耳病毒抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書產品內容】

試劑盒主要成分

抗原包被板(PRRSV

96T×1

陽性對照

1ml×1

陰性對照

1ml×1

酶標結合物

20ml×1

樣品稀釋液

50ml×1

底物液

20ml×1

終止液

15ml×1

20×濃縮洗滌液

50ml×1

封口膠

2

使用說明書

1

【成分性狀】

包被板

96孔塑制微孔板,無色透明,干燥,無雜質吸附

酶標結合物

略帶黃色澄明液體

陰、陽性對照

略帶黃色澄明液體

樣品稀釋液

略帶黃色澄明液體

濃縮洗滌液

無色或略帶黃色的澄明液體

底物液

無色或微藍色澄明液體

終止液

無色澄明液體,低溫條件下可能會出現絮狀沉淀

【用法與判定】 按以下步驟進行:

1、需要自備的器材

1.1 微量移液器;

1.2 微量移液器配套使用的槍頭;

1.3 用來稀釋洗滌液的500ml量筒;

1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀;

1.5 用于稀釋樣品的1.5ml Ep管;

1.6 蒸餾水或去離子水。

2、樣品的制備

用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行50倍稀釋(建議:4μl血清樣品加入196μl樣品稀釋液中),樣品加入包被板前要充分混勻,稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意:①制備血清用的血液樣本應無溶血現象發生;②不能稀釋陰性、陽性對照。

3、操作步驟 (﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻,所有試劑應恢復至室溫

3.1 A1A2孔中分別加入100μl陰性對照;

3.2 A3A4孔中分別加入100μl陽性對照;

3.3  100μl稀釋好的待檢樣品加入相應孔中,并做好記錄;

3.4 37孵育30min;

3.5  將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶,需先溶解后,方可進行稀釋)進行洗板,重復5次,每次30s;

加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果,盡量將孔內洗滌液拋甩干凈;

3.6 每孔加100μl酶標結合物;

3.7  37孵育30min;重復步驟3.5;

3.8 每孔加100μl底物液;

3.9  37℃孵育10min(避光顯色);

3.10  每孔加50μl的終止液;

3.11  立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值,即OD450值。

4、試驗有效性判斷

4.1陰性對照:正常情況下,陰性對照孔OD450≤0.3;

4.2陽性對照:正常情況下,陽性對照孔OD450≥0.6;

4.3臨界值(C.O.)計算:臨界值=0.18+陰性對照均值;陰性對照OD450值大于0.3時應舍棄,如所有陰性對照OD450值均大于0.3時須重復實驗;陰性對照低于0.05時以0.05計算。

4.4結果判定: 檢測樣品OD450臨界值,判定該檢測樣品為陽性; 檢測樣品OD450值<臨界值,判定該檢測樣品為陰性。

【注意事項】

1)待檢血清樣品數量過多時,應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后,再統一將血清樣品加入酶標板中,使反應時間一致。

2)試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。

3)底物液和終止液對皮膚有刺激性,注意防護。

4)底物液不要暴露于強光和任何氧化劑;使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。

5)所有試劑應在28℃存放;使用前恢復到室溫,使用后放回28℃。

6)注意防止試劑盒分受到污染。

7)不要使用超過有效期的試劑,不同批次試劑盒的分不要混用。

8)操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。

【規格與包裝】96T×2

【貯藏與有效期】28℃避光保存,有效期為12個月

僅供獸醫診斷使用



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