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犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書

型 號

產品時間2021-12-14

所屬分類動物疫病試劑盒

報價

產品描述:犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書【用途】 本試劑盒采用夾心ELISA方法定性檢測犬糞細粒棘球絳蟲抗原。

產品概述

犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書

【產品名稱】

通用名稱:犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA檢測試劑盒

英文名稱:Hydatid Hyd coproantigens Test Kit for Canine.

【用途】 本試劑盒采用夾心ELISA方法定性檢測犬糞細粒棘球絳蟲抗原。

規格 96T/盒

【儲藏與有效期 28保存,有效期12個月。

【試劑盒組成】

名稱

數量

名稱

數量

抗原包被板

96T

終止液

15mL

酶標結合物

12mL

陽性對照

0.8mL

洗滌液10×

100 mL

陰性對照

0.8mL

底物液

15mL

封板膜

3

顯色液

15mL

說明書

1份

樣品稀釋液2X

100mL



 

犬細粒棘球絳蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書溶液配制】

1. 洗滌液配制:用蒸餾水或去離子水將洗滌液 10× 1:9 稀釋,充分混勻即為工作濃度洗滌液。

2. 樣品稀釋液配制:用蒸餾水或去離子水將樣品稀釋液 1:1 稀釋(如取100mL 濃縮樣品稀釋液加 100mL 蒸餾水或去離子水),充分混勻即為工作濃度樣品稀釋液。

【實驗準備】所有試劑使用前恢復至室溫(25左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。

【樣品要求】
1. 本試劑適用于檢測犬糞樣品;
2. 應采集新鮮的犬糞樣品進行測試。若不能及時檢測,應將糞樣低溫凍存,防止反復凍融。如犬糞難以溶解,應適當搗碎處理。

【操作步驟】

1. 樣品處理:犬糞樣品需要預先低溫( -70℃以下) 冷凍 7 天以上,以滅活蟲卵。稱取 1克犬糞,加入1mL樣品稀釋液,充分攪拌混勻,靜置10分鐘,再3000rpm離心10分鐘,取上清液待檢。
2. 加樣反應:樣品孔,每孔僅加入100μL待檢樣品;陰性對照2孔,每孔僅加入100μL陰性對照品;陽性對照 2 孔,每孔僅加入 100μL 陽性對照品。蓋好封板膜,37℃避光反應30分鐘。

3. 洗板:甩去孔內液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗板3 次,每次均需靜置1分鐘;最后一次甩凈,拍干。

4. 加酶反應:每孔加酶結合物100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應30分鐘。甩去孔內液體,如上洗板,拍干。

5. 顯色反應:按所需用量,臨用前取等體積底物液和顯色液充分混勻后每孔加100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應10分鐘。

6. 終止反應:加終止液50μL,用酶標儀于450nm波長(630nm作為參比波長)讀取OD值。

【結果判定】

1. Cut-off 值(COV=陰性對照平均OD×2.1(陰性對照孔OD 值<0.15 時按0.15計)。
2. 有效性判定:
陰性對照孔 OD 0.30 若大于 0.30 則實驗無效);
陽性對照孔 OD 0.50 若小于 0.50 則實驗無效)。

判定標準

樣品 OD COV, 判為犬細粒棘球絳蟲抗原陽性;
樣品 OD 值<COV, 判為犬細粒棘球絳蟲抗原陰性。

【檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查,不作為確診依據。

【注意事項】

1. 所有試劑使用前恢復至室溫(25左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。

2. 實驗前應用溫度計檢查溫箱溫度,溫度過高或過低影響OD值高低。

3. 包被板反應時嚴禁堆疊放置,應該平鋪且板間有空隙,不要離溫箱壁太近。

4. 實驗所用移液器及設備應定期校準。

5. 底物液和終止液對皮膚有刺激性,帶手套注意個人防護。 


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